Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы. 11
1. Физико-химические и общебиологические характеристики декстранов, применение в биотехнологии 11
1.1. Общее описание. 11
1.2. Применение декстранов в биотехнологиях. 11
1.3. Биологические эффекты декстранов . 14
2. Эндосомально-лизосомальный компартмент 15
2.1. Эндосомы и лизосомы. 15
2.2. Регуляторы лизосомального биогенеза. 17
2.3. Механизмы активации белков TFEB и TFE3 18
2.4. Эффекты активации TFEB. 19
2.5. Лизосомы как сигнальные платформы. 20
2.6. Лизосомальная сигнальная трансдукция, ассоциированая с иммунными реакциями 22
3. Аутофагия . 23
3.1. Общее описание. 23
3.2. Аутофагия участвует в иммунном ответе на внутриклеточные патогены. 26
3.3. Аутофагия участвует в регуляции иммунных процессов . 27
3.4. Аутофагия и поляризация макрофагов. 28
4. Регуляторные функции внутриклеточных редокс-процессов. 29
4.1. Активные формы кислорода. 29
4.2. АФК как вторичные мессенджеры. 30
4.3. Редокс-контроль сигнальной трансдукции. 32
4.4. Редокс-контроль аутофагии 32
4.5. Регуляция продукции и концентрации АФК. 33
4.6. Сигнальная система Keap1/Nrf2/ARE. 33
4.7. Регуляция активности Nrf2. 34
4.8. Контроль метаболических процессов транскрипционным фактором Nrf2. 36
5. Болезни накопления 38
Глава 2. Материалы и методы 42
Глава 3. Результаты и обсуждение 52
1. Исследование кинетики эндоцитоза декстранов клетками различного гистогенеза 52
2. Влияние декстранов на состояние лизосомального аппарата в ранние сроки после нагрузки декстраном
3. Влияние декстранов с молекулярной массой 40 и 70 кДа на аутофагию в клетках J774 61
4. Исследование генерации АФК 65
4.1. Исследование генерации АФК при нагрузке лизосомального аппарата клеток декстранами 65
4.3. Влияние декстранов на индуцированное хлоридом аммония перекисное окисление липидов 70
5. Исследование влияния декстрана на индукцию сигнальной системы Keap1/Nrf2/ARE . 72
5.1. Результаты исследования транслокации Nrf2 в клеточное ядро. 72
5.2. Результаты исследования внутриклеточного содержания и распределения белка Keap1 в клетках J774 72
5.3. Результаты исследования экспрессии генов, контролируемых Nrf2
6. Влияние декстранов на стимулированную бактериальным липополисахаридом продукцию цитокинов макрофагами in vitro и in vivo. 79
7. Исследование регуляторной связи сигнальной системы Keap1/Nrf2/ARE и транскрипционных регуляторов лизосомального биогенеза .
7.1. Поиск регуляторных последовательностей ARE в генах мастер-регуляторов лизосомального биогенеза TFEB и TFE3. 83
7.2. Экспериментальная проверка возможности регуляции лизосомального биогенеза со стороны сигнальной системы Keap1/Nrf2/ARE 87
7.3. Исследование влияния индукторов Keap1/Nrf2/ARE на аутофагию 89
Заключение 93
Выводы 97
Список литературы. 99
